白蟻菌圃的抗炎實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果與分析

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　　黑翅土白蟻的菌圃，由白蟻分泌物組成，早在明代李時(shí)珍的《本草綱目》中就已有記載。白蟻菌圃富含游離脂肪酸 ，并具有較好的抗炎免疫作用 。本文報(bào)道白蟻菌圃不同提取方法的抗炎效果。早在1857年,李時(shí)珍在《本草綱目》中就記述了白蟻是一種中藥材:“白蟻即蟻之白者,一名熨,一名飛蟻.穴地而居蠢木而食,因濕營土,大為物害。初生為蟻嫁,至夏至遺卵,生翼而飛,則變黑色,尋亦隕死……”川.1983年出版的《中國藥用動(dòng)物志》又記述了家白蟻全體入藥,有滋補(bǔ)強(qiáng)壯的功能‘幻.主治老年體衰、久病氣血虛弱等。近年來還正在研究用白蟻?zhàn)鳛榭拱┧幬?/SPAN>‘召’,并受到有關(guān)方面的重視.黑翅土白蟻是典型的土棲白蟻,它能在土壤中栽培菌圃,以此作為棲息和攝食場(chǎng)所.它一般生活在無污染的山林、果園、竹林、水庫堤壩的土壤中,間接地從土壤攝取所必需的金屬元素,維持正常生命活動(dòng).本文分析黑翅土白蟻及其菌圃的必需金屬元素組成,供開發(fā)利用參考.一、材料與方法 1.材料來派由衡州市白蟻防治研究所提供的三個(gè)黑翅土白蟻成年巢,分別采自簡(jiǎn)州市的十里豐林場(chǎng)、巖頭林場(chǎng),江山縣的鳳林鄉(xiāng). 2.方法活的蟻巢取出后,分別選出有翅繁殖蟻、工蟻和純菌圃(即除去白蟻的菌圃),80℃烘烤至恒重.干樣品磨成粗粉,即可制備樣品,用原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定.6期張貞華等:黑翅土白蟻及其菌國的9種必需金屬元素組成。

　　白蟻菌圃的抗炎實(shí)驗(yàn)1 材料

　　1.1 藥物及試劑 白蟻菌圃粉碎成粗粉，分別用水、90% 乙醇及乙酸乙酯依次回流提取。每種溶劑提取3次，合并3次濾液，蒸餾回收溶劑，最后得到三種提取物，濃縮成浸膏。使用時(shí)用蒸餾水配成相應(yīng)濃度，乙醇和乙酸乙酯提取物則用0.5% 羧甲基纖維素鈉配成混懸液。醋酸地塞米松(天津藥業(yè)集團(tuán)有限公司，批號(hào)031042);伊文思蘭(進(jìn)口分裝，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

　　1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠體重l8—22 g;SD大鼠體重180—220 g，均雌雄各半，購于江西醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

　　白蟻菌圃的抗炎實(shí)驗(yàn)2 方法

　　2.1 對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響 小鼠112只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為8組;空白對(duì)照組(生理鹽水20 ml/kg)、陽性對(duì)照組(地塞米松mg/kg)、水提物組(45和22.5 kg)、乙醇提取物組(40和20 kg)、乙酸乙酯提取物組(23和kg)(下同)，分別ig給藥，連續(xù)14天。末次給藥后h，用乙醚輕度麻醉。在小鼠右耳兩側(cè)涂二甲苯0.02 ml/只為致炎耳，左耳不作任何處理為非致炎耳。4 h后將動(dòng)物處死，剪下兩耳，用直徑8 mm的打孔器分別鑿出相同部位相同大小的耳廓，用電子天平稱重。以致炎耳廓重減去非致炎耳廓重的差值作為腫脹值。抑制率=(對(duì)照組耳腫脹度一用藥組耳腫脹度)/對(duì)照組耳腫脹度×100% 。數(shù)據(jù)采用組間T檢驗(yàn)(下同)。

　　2.2 對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響 小鼠160只，雌雄各半，分組與給藥劑量同上。末次給藥1 h后，各組于尾靜脈注射0.5%伊文思蘭10g(體重)，并立即腹腔注射0.6% 的冰醋酸ml/10g后頸椎脫臼處死。腹腔注射5 ml生理鹽水，輕柔，再剪開一小口，用吸管吸出洗液(如有出血?jiǎng)t棄去不用)。再以3000 rpm離心12～15 min，取上清液于722分光光度計(jì)590 nm波長(zhǎng)測(cè)吸光度。

　　2.3 對(duì)大鼠棉球植入所致的肉芽腫的影響 取180～220 g，SD大鼠112只，雌雄各半。手術(shù)前一天將大鼠按體重、性別隨機(jī)分為8組，分別給相應(yīng)的藥物(劑量同2.1項(xiàng))。第二次給藥后乙醚麻醉，在大鼠兩側(cè)腋窩下剪開約1 cm的小口，將兩個(gè)滅菌棉球(每個(gè)棉球重50±1 mg。高壓滅菌，各加入氯芐青霉素1 mg/0.5 ml，50℃烘箱烤干)分別植入皮下，縫合創(chuàng)口，并在創(chuàng)口局部涂以少量抗生素。第8次給藥后頸椎脫臼處死，取出棉球，剝離附著的結(jié)締組織，在60~C烤箱烘12 h后稱重，減去原來棉球重量，即為肉芽腫凈重，取兩側(cè)肉芽腫質(zhì)量的均值。

　　2.4 對(duì)角叉菜膠致小鼠足腫脹的影響 小鼠只，按性別體重隨機(jī)分為4組：乙醇提取物組kg)、乙酸乙酯提取物組(23 kg)、對(duì)照組(生理鹽水20 ml/kg)、陽性對(duì)照組(地塞米松5 mg/kg)，連續(xù)給藥10天。在末次給藥前，于右足踝關(guān)節(jié)處劃線作標(biāo)記，在毛細(xì)管放大裝置中測(cè)足的原始體積。給藥1 h后，于右足皮下注射1% 角叉菜膠0.05 ml。

　　致炎后30 min、1 h、2 h、4 h測(cè)體積，并計(jì)算各組腫脹度。

　　白蟻菌圃的抗炎實(shí)驗(yàn)3 結(jié)果

　　3.1 三種提取物，對(duì)小鼠耳廓腫脹抑制作用以乙醇提取物高劑量組作用最為明顯。

　　3.2 三個(gè)組分給藥都有減輕小鼠毛細(xì)血管通透性的作用(P值都小于0.05)，且作用程度比較相似。

　　3.3 抑制棉球肉芽腫實(shí)驗(yàn)以乙酸乙酯提取物高劑量組的效果最為明顯(P<0.01)，乙醇提取物高劑量組未出現(xiàn)明顯的作用，其它各個(gè)劑量組效果相近，且都有顯著作用(P<0.05)。

　　3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，白蟻菌圃兩組提取物對(duì)角叉菜膠致小鼠足腫脹足跖腫脹均有抑制作用，對(duì)致炎2 h和4 h后的抑制作用有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

　　白蟻菌圃的抗炎實(shí)驗(yàn)4 討論

　　炎癥是一種防御性反應(yīng)，人類疾病中最為常見。

　　炎癥的基本病理變化包括局部組織損傷、血管反應(yīng)和組織增生，通常概括為局部組織的變質(zhì)、滲出和增生。炎癥依其病程可分為兩大類：急性炎癥和慢性炎癥。本實(shí)驗(yàn)選取了二甲苯致小鼠耳廓腫脹、醋酸誘導(dǎo)的毛細(xì)血管通透及又菜膠致小鼠足腫脹的急性炎癥模型和大鼠棉球肉芽腫的慢性炎癥模型。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明白蟻菌圃對(duì)炎癥中出現(xiàn)的變質(zhì)滲出和增生都有較好的抑制作用。這與古文獻(xiàn)所記載的“白蟻泥，主治惡瘡腫毒” 相符合。有關(guān)白蟻菌圃的抗炎機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。